程颖：反转细胞在小细胞肺癌临床研究中的进展

周而复始巨噬细胞( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检标本”，已在重新分配性乳癌、癌和结直肠癌之前用于HRS评价。小巨噬细胞心肌梗塞(Small celllung cancer，SCLC)有组织标本举例欠缺，且缺乏有效的数据归纳发作重新分配和预测HRS的生物；也。有约年来专攻术研究实践中CTCs在SCLC之前的医学运用于进在行了探究性专攻术研究，挖掘出CTCs对SCLC的病因、应于，数据归纳发作、重新分配，归纳、HRS以及建立联系源泉化疗方案等不具备不可忽视涵义，本文就CTCs在SCLC医学运用于之前的专攻术研究困难重重应予综述。

一、SCLC症状CTCs的验证方通则

CTCs的验证方通则主要有流式巨噬细胞验证核心技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一蛋白酶链重排(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch子系统、CTC芯片(CTC-chip)核心技术和膜滤过分离巨噬细胞核心技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之前CellSearch子系统因其半自动化的操作应用软件，较高的酪氨酸、依赖性和可重复性，成为最常运用于的CTCs验证方通则。

早在2004年，Allard等迅即运用于CelISearch通则验证了99事例心肌梗塞（未列举SCLC事例数）症状的CTCs，随后Nagrath等改用CTC-chip通则验证了55事例心肌梗塞症状肝细胞屑C TCs。2009年此后的专攻术研究多改用CeIISearch通则验证SCI．C症状肝细胞屑CTCs，然而该方通则由于对缺乏上皮巨噬细胞特点的巨噬细胞不会出现漏检或许，且与免疫反应磁珠及免疫反应球蛋白转变成的CTCs无通则在行某些不足之处的验证，医学运用于受到限于。

有约年来，随着基体科技的发展，小分子CTCs内层；也的酪氨酸辨别分f修饰的基体材料转变成薄流控核心技术的CTCs验证应用软件的专攻术研究受到尤其关注，2013年，《自然环境》（Nature）杂志将CTCs基体验证评为最具创新性和转变成潜能的病因新方通则，实践中实在太瞩目。但就目前为止来看，这两项的CTCs验证方通则各有利弊，未有专攻术研究声称哪种方通则对SCLC的CTCs验证愈来愈有优势。着眼未来不会，亟需要开发酪氨酸、依赖性愈来愈高的CTCs验证核心技术，为SCLC的基础和医学专攻术研究带给突破。

二、CTCs在SCLC医学运用于之前的专攻术研究现状

（一）CTCs计数器与SCLC的病因、应于

有约年来多项专攻术研究说明了CTCs计数器技术水平与SCLC的病因、应于有密切关系0 2009年Tanaka等运用于CeIISearch通则验证了1 50事例7.5ml肝细胞屑CTCs，其之前心肌梗塞1 25事例、非恶性25事例，心肌梗塞症状包含116事例非小巨噬细胞心肌梗塞(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9事例SCLC。

专攻术研究结果说明了SCLC症状CTCs阳性率为66.70-/0（6事例／9事例），显着优于NSCLC症状的CTCs阳性率(癌25.9%，鳞癌40.9%；癌对比SCLC，P

同年，Hou等运用于CeIISearch通则验证了50事例初治的SCLC症状肝细胞屑CTCs，包含20事例限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)症状和30事例尤其期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)症状，终端期ED-SCLC及LD-SCLC症状的之前位CTCs计数器都为237和2个/7.5ml屑，7事例未已确定CTCs的症状皆为LD-SCLC，证明了CTCs计数器技术水平与SCLC应于涉及。

相像的论断在2012年被日本人类专攻家Naito等声称，专攻术研究实践中在51事例SCLC症状之前立用CeIISearch通则验证终端期CTCs技术水平，结果说明了ED-SCLC,症状的之前位CTCs计数器为9.5个f 7.5ml屑，而LD-SCLC仅为1个／7.51111屑，实质性证明了ED-SCLC症状的CTCs技术水平优于LD-SCLC症状。

（二）CTCs归纳SCLC的及HRS

CTCs否可作为归纳SCLC和HRS的有救就是指f,箸专攻术研究实践中们多年来在探究的关键问题。Houi等在2009年通过CellSearch通则验证了50事例SCLC症状(LD-SCLC20事例，ED-SCLC30事例)的CTCs，挖掘出CTCs>300个/7.5ml屑的症状及CTCs

终端期CTCs>=50和

在该专攻术研究之前SCLC症状的HRS界乘积旧版8个/7.5ml屑，愈来愈实质性将症状分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样运用于CellSearch通则验证59事例SCLC症状在终端期、1时间尺度低剂量后及4时间尺度低剂量过后后外固屑CTCs技术水平，其之前ED-SCLC症状38事例，LD-SCLC症状2 1事例c终端期有43事例症状(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml屑，CTCs>215个/7.5ml屑和CTCs

经过1时间尺度低剂量后症状CTCs技术水平显着降低，且1时间尺度低剂量后CTCs

专攻术研究实践中推算CTCs技术水平是SCLCHRS的实质上影响因子，其之前1时间尺度低剂量后CTCs技术水平是SCLC和HRS最强者的预测因子。

2013年ASCO发表的ECOG1508专攻术研究之前，专攻术研究实践中愈来愈实质性在155事例ED-SCLC之前投身于小分子化疗，并对其之前123事例症状终端期CTCs进在行验证，结果说明了小分子化疗未能延长ED-SCLC症状的PFS和OS，但挖掘出终端期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml屑的mPFS都为4.4和4.3个同月（P=0.07），OS都为10.7和7.2个同月(P=0.01)。专攻术研究实践中认为虽然小分子化疗一定不会能提高ED-SCLC症状的PFS和OS，但却挖掘出了CTCs或许是SCLC症状的HRS；也。

最有约，Igawa等愈来愈实质性运用于OBP-401实验验证SCLC症状肝细胞屑CTCso运用于OBP-401实验验证乳癌和胃癌症状CTCs的涉及专攻术研究仅有中后期报道。专攻术研究纳入30事例韧治的SCLC症状，29事例症状(96%)肝细胞屑CTCs阳性。在终端期，21事例症状CTCs

（三）CTCs数据归纳SCLC的发作和重新分配

这两项的专攻术研究表明通过验证CTCs的出现来数据归纳SCLC的发作和重新分配不具备不可忽视的医学涵义o Tanaka等专攻术研究挖掘出CTCs技术水平‘j 125事例心肌梗塞症状（包含9事例SCLC症状）困难重重显着涉及，比如说是与远方重新分配密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些样本，写作者认为CTCs可作为数据归纳心肌梗塞远方重新分配的生物标记物。Natio等专攻术研究挖掘出SCLC在终端期、化疗过后后及发作后CTCs的阳性率都为68.6%、26.5%和67.6，提醒SCLC发作后肝细胞专攻CTCs技术水平急剧下降，起因远方重新分配脏器的个数为0、1和>=2的症状其之前位CTCs计数器都为2.0、7.5和21个/7.5ml屑,提醒CTCs技术水平与远方重新分配脏器的个数有关，远方重新分配就越多，CTCs计数器就越高（p

三、CTCs在SCLC医学运用于之前的探究方向

发作和重新分配是造成了症状化疗失败和被害的主要原因，逃过一劫的发作和重新分配并采敢积极有效的化疗举措可显著提高症状存活率。然而，由于SCLC缺乏尽可能数据归纳发作和重新分配的生物；也，且常规影像专攻核查无通则挖掘出薄重新分配灶及薄小湿气结膜，造成了起因发作和重新分配的SCLC症状没法立刻接受病因和化疗。

医学之前部分LD-SCLC的症状HRS歧异较大，提醒有些限于期的症状在病因时或许已起因了影像专攻没法挖掘出的薄重新分配而成为潜在的尤其期症状。通过验证肝细胞屑CTCs的出现及个数改变从而对SCLC症状细胞内完全进在行快照、快照地数据归纳和评价，逃过一劫的发作、重新分配，将有助于医学精神科对化疗才会的把握和化疗策略的选项，但是否是CTCs的个数或改变数值为多少时尽可能正确地揭示SCLC的发作或重新分配亦然不明确，必需要愈来愈多的循证药理专攻证据应予大力支持。

CTCs在归纳SCLC症状化疗方面的运用于亦然西北面探究中后期，化疗现实生活之前CTCs个数的改变与SCLC症状低剂量的涉及性及其与SCLC症状放疗才会的选项等关键问题在未来不会需要大量的医学专攻术研究。有约5年，对CTCs否可作为SCLC症状HRS就是指标的专攻术研究逐渐增多，但SCLC最佳的HRSCTCs界乘积亦然无定论，争议颇多。

其之前3项来自Hou、Naito、Hiltermann的专攻术研究将SCLC的HRSCTCs冇乘积分别旧版为50、8和2个／7.5ml屑，歧异愈来愈大，这或许与专攻术研究改用的统计专攻方通则不尽相同以及入组样本量较少有关。有约期威尼斯人类专攻家Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC症状从前专攻术研究，对终端期、l时间尺度低剂量后CTCs以及化疗前后CTCs的改变数值分别旧版HRS界乘积，为未来不会的专攻术研究透过了一新设想。来龙去脉所在的研究机构团队也自始积极参与必先SCLC症状HRS最佳CTCs界乘积的专攻术研究，结果实在太期待。

的源泉化疗是化疗模式的发展方向。SCLC症状对低剂量抗生素的重排共存显着的个体歧异，其主要原因或许与有用的表型、基因序列表达歧异及基因型有关。所以，逐步明晰SCLC的真核生物专攻特点对实现真自始涵义上的SCLC源泉化疗尤为不可忽视。有约期必先人类专攻家王洁等专攻术研究人员通过运用于单巨噬细胞基因序列PCR意图对症状单个CTC进在行以外真核生物、胺基酸真核生物PCR。

在此项专攻术研究之前，谢晓亮教授发明家的多重退火和加成重排周而复始的逐次核心技术(MAIBAC)，成功实现了对症状肝细胞屑单个CTC的以外真核生物逐次和深度PCR，在单个巨噬细胞技术水平测定以外真核生物基因序列拷贝数相异(CNVs)和单核苷酸相异(SNVs)o单巨噬细胞技术水平CTCs真核生物PCR核心技术可立刻透过如耐药基因序列突变等源泉化疗所需要的不可忽视信息，同时也为未来不会SCLC小分子抗生素的开发透过核心技术大力支持。

SCLC有组织标本不能获取，受限了不足之处各项检验专攻术研究的筹划，而运用CTCs紧密结合的SCLC周而复始巨噬细胞移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望补救这一急迫疑难。最有约，Hodgkinson等愈来愈实质性将6事例ED-SCLC症状lOml肝细胞屑之前的CTCs提取后注射到免疫反应缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠脖子逐步形成了CDXs，证明了SCLC症状的CTCs不具备致瘤性。

同时运用于CelISearch通则验证这6事例SCLC症状的CTCs，结果说明了成功逐步形成CDXs的4事例症状的CTCs计数器皆>400个／7.5ml屑，而另外2事例未逐步形成CDXs的症状其CTCs计数器都为222和20个／7.5ml屑，提醒SCLC的CTCs致瘤性与肝细胞屑CTCs教量有关。实质性归纳挖掘出相对来说于低剂量依赖性SCLC，低剂量耐药性SCLC症状的CDXs倍增一段时间短、生长愈来愈不断。对3事例CDXs予以顺铂和依托泊苷低剂量抗生素，其依赖性依次为CDX3>CDX2>CDX4，相应症状的OS都为9.7.3.5.0.9个同月，提醒对CDXs进在行灌注药敏实验可以间接重排症状存活一段时间。

该专攻术研究说明了部分SCLC的肝细胞屑CTCs不具备干巨噬细胞适应性，可进在行灌注培养、逐步形成与原发高度相像的CDXs，为SCLC症状的灌注药敏实验、耐药前提归纳等一系列检验专攻术研究透过了发挥作用的有组织，补救了SCLC症状标本举例欠缺的关键问题。

论断

从现在行的专攻术研究可以看出，虽然CTCs在SCLC之前的医学运用于仍西北面探究中后期，但前景广阔。目前为止，诸多转变成性专攻术研究自始在进在行之前，相信随着专攻术研究的不断深入，CTCs有望成为SCLC的迈出，期待CTCs在SCLC的领域之前为我们带给精采。

撰稿人： 雪